使用说明：
1.打算试剂：温度融解并混匀膜蛋白抽提试剂A和B，融解后立刻放在冰浴上。取适量的膜蛋白抽提试剂A和B备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终含量为1mM。
2.打算细胞或组织样品：
a.对于细胞
(1)搜集细胞
对于贴壁细胞：培养约2000-5000万细胞，用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞或用富含EDTA但不含胰酶的细胞消化液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。离心搜集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。尽量避开用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的膜蛋白。
对于漂浮细胞：培养约2000-5000万细胞，直接离心搜集细胞细胞膜蛋白，吸除上清，留下细胞沉淀备用。
(2)漂洗细胞：用适量冰浴预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀，取少量细胞用于计数，剩余细胞4℃，600g离心5分钟沉淀细胞。弃上清，此后4℃，600g离心1分钟，以沉淀离心管管壁上的残留液体并进一步沉淀细胞，尽最大努力吸尽残留液体。
(3)细胞预处理：把1毫升临用前添加了PMSF的膜蛋白抽提试剂A加入至2000-5000万细胞中，轻轻并充分漂浮细胞，冰浴放置10-15分钟。
b.对于组织：
取约100微克组织，用剪子尽量当心剪切成细小的组织碎片。加入1毫升临用前添加了PMSF的膜蛋白抽提试剂A，轻轻漂浮组织碎片，冰浴放置10-15分钟。注：假如组织样品比较少，也可以使用更少的组织量，比如30-50mg细胞膜蛋白，后续试剂的药量及操作步骤不变；组织药量较少时，最后获得的膜蛋白也较少。
3.细胞或组织样品的破碎及破碎疗效的鉴别：把细胞悬液或组织样品转移到一适当大小的冰浴预冷玻璃匀浆器中，匀浆约30-50下。匀浆疗效与细胞类型和组织类型相关，不同细胞或组织所需的匀浆次数有所不同，需自行优化。一般可以在匀浆30次后取约2-3下挫细胞或组织匀浆液滴在盖玻片上并在显微镜下观察，如见细胞核周晕环(Ashinyringthe)或完整的细胞形态，说明细胞仍完整。假如有70-80%的细胞均无核周晕环和完整细胞形态，说明细胞早已充分破碎，则进行下一步实验。否则，重新匀浆10-30次直至细胞起码70%早已破碎。同时记录对于该细胞的匀浆次数，一般在后续实验时毋须再摸索匀浆次数。另外需注意特定的匀浆次数和匀浆器也有关，需同时注意记录使用的是哪一个匀浆器。
注：假如没有适当的玻璃匀浆器，对于培养的细胞也可以采用冻融法来破碎细胞。把步骤2中的样品在液氮和温度依次反复冻融两次，之后取少量样品在显微镜下检查细胞破碎的程度。假如细胞破碎的程度不足70%，可降低冻融次数，直至细胞破碎的程度小于70%。
4.清除细胞核和未破碎的细胞：4℃，700g离心10分钟，当心搜集碱液至一新的离心管中。汲取上清时请勿接触沉淀！可以有约30-50下挫碱液残留不予汲取，以保证汲取的碱液有较高的含量。
5.沉淀细胞膜碎片：4℃，离心30分钟，以沉淀细胞膜碎片。
6.搜集细胞浆蛋白：汲取上清即为细胞浆蛋白，可-70℃保存备用。汲取上清时可以有30-50下挫上清残留，以防止接触沉淀造成上清样品被污染。每5000万细胞使用本产品裂解可获得5-30mg细胞浆蛋白,不同细胞有所不同。
7.抽提膜蛋白：4℃，离心10秒，尽最大努力吸尽上清。可以轻轻碰触到沉淀，甚至吞掉很少量的沉淀。加入膜蛋白抽提试剂B200下挫(如有必要，也可以加强到300下挫)，最高速剧烈5秒重悬沉淀，冰浴5-10分钟。重复前述步骤的和冰浴孵育1-2次，以充分抽提膜蛋白。随即，4℃，离心5分钟，搜集上清即为细胞膜蛋白碱液。可-70℃保存备用。对于一些有特殊用途的膜蛋白，可自行配制适当的膜蛋白抽提试剂进行膜蛋白抽提。每5000万细胞使用本产品裂解可获得0.3-3mg细胞膜蛋白,不同细胞有所不同。