湖北第二师范大学生物系,湖南长沙;惠阳农业工程大学农业与园林大学,江苏南京)摘要:对简易曝晒和常规抽气两种测定动物茎秆相对浊度率的方式进行比较研究,结果显示:借助曝晒法(处理12与抽气法(处理所测得的茎秆相对浊度率值呈极明显正相关,说明两种测定方式考察动物茎秆膜透性的整体变化趋势具有一致性.经残差剖析结果显示,两种测定方式测定值间的差别均不明显(因而,考虑到用曝晒法比抽气法操作便捷、更加节约材料处理时间,建议曝晒方式在实验室剖析技术中推广使用.关键词:相对浊度率;动物茎秆;曝晒法;抽气法中图分类号:94文献标示码:文章编号:(2010)收稿日期:作者简介:福建建阳人,广州第二师范大学生物系院长.相对浊度率是反映动物膜系统状况的一个重要的生理生化指标,动物在遭到逆境或则其他损伤的情况下细胞膜容易断裂,膜蛋白受伤害以致使胞质的胞液外渗而使相对浊度率减小,其反映直接实际,是一个比较有用的数据.测定浊度率的方式有多种,按照现代动物生理学实验手册上面提及的传统方式,浊度率是用抽气法测定,其测定结果稳定、精确,但实验过程较为复杂,费时,而按照新版动物生理学实验指导是通过曝晒法来测定浊度率.此法操作便捷、省时,但其确切程度有待研究.因而,本实验通过与浊度率值传统抽气测定方式的比较研究,进一步对曝晒法在精确度、时效性及成本等方面深入剖析,验证其在现实操作中的应用可行性细胞膜透性,具有一定实践意义.仪器与设备浊度仪、抽真空注射器、烧杯、胶头滴管、刻度试管、剪刀、镊子、试管架、滤纸、玻璃棒、记号笔、标签、铁架台、电子天平、电炉.实验材料两种方式的实验材料均采用来源相同的14养殖物茎秆,分别命名为:L1(Vol.年.,S2,S3,S4,S5,S6,P1,P2,P3,P4及P5(鉴于材料来源需保密细胞膜透性,因而在本文中均以字母代码给出)各样本材料中,L1,L2,L3是生长正常的三种动物茎秆,S1~S6P1~P5样本均由实验员专门提供(其中,S1~S6样本是经不同含量果酸处理过的萝卜苗茎秆,P1~P5样本是经过不同含量PP333矮化处理过的萝卜苗茎秆(果酸处理和PP333处理瓜苗主要是为了研究不同处理对降低瓜苗抗性的疗效。
样本含量编码样本P5含量(mg/分别代表样本S1~S6分别代表样本P1P5曝晒法取大小相当的动物茎秆(尽量保证茎秆的完整性,用自来水沥干后再用分馏水冲洗3用滤纸吸走表面水份,将茎秆剪成适合宽度的长条(避免主脉)别放在10ml去离子水的刻度试管中,盖上玻璃塞放在温度下曝晒处理12之后开水浴加热30min,冷却至温度后磨碎,再度测定浸提液浊度(R2)相对浊度率=R1/R2抽气法取大小相当的动物茎秆(尽量保证茎秆的完整性,用自来水冲洗后再用分馏水冲洗干净,用滤纸吸净表面水份.避免主脉将茎秆切割成大小一致的叶块,混和均匀,称量0.ml去离子水的注射器中,不断抽气漏气,直到茎秆完全坠入水中,将抽真空后的茎秆在离子水底处理用浊度仪测定浸提液浊度(R1)之后开水浴加热30min,冷却至温度后磨碎,再度测定浸提液浊度(R2)复三次.相对浊度率=R1/R2不同测定方式浊度率测定值比较14养殖物茎秆的相对浊度率值测定结果如图所示。从图1可以看出两种测定方式的测定值存在一定差别.总体上抽气法测定值低于曝晒法测定值.两种浊度率测定方式测定值反映出的不同处理间相对浊度率变化趋势基本一致(抽气法与曝晒法测定值之间差别剖析剖析两种测定方式测定值差别(可知,用抽气法和曝晒法测得的相对浊度率值有一定差别,最大相对浊度率差别比率达到了37.93%,最小差别比率为2.15%,测定值总体上是用抽气法所得的浊度率值低于用曝晒法所得值,差别平均值为17.11%,总体差别不大.抽气法与曝晒法测定值之间差别样本曝晒法81抽气法91差值10差别百分率17.4621..4524.0737.9316.6737.7025..99抽气法值-曝晒法值)抽气法值!100相关与残差剖析对通过两种方式测得的相对浊度率值进行相关剖析得出,两组数据的相关性达到极明显水平,其相关系数达到0.937,说明这两种方式考察动物膜透性变化具有高度一致性.残差剖析结果显示(进一步说明两种方式分别测得的两组样本相对浊度率值之间的整体差别不大,即两种方式在现有数据样本剖析基础上完全可以取代.还不足以以现有数据为基础确立两种方式之间的线性关系,有待于进一步研究.两种方式所获数据之间的残差剖析结果平方和自由度合计92427讨论与推论依据以上相对浊度率的原始结果,以及对结果进行相关剖析和残差剖析,得出:简易曝晒法与复杂抽气法测定值之间存在极明显相关关系,两组测定值之间差别不明显,可以取代使用.曝晒法因为降低了人工操作程序,才能降低操作偏差,更有利于实验结果的彰显.对比试验数据发觉抽气法测定值低于曝晒法测定其主要诱因可能是动物茎秆抽气后完全浸入于水底,电解质渗出更完全。
动物相对浊度率是反映动物细胞膜透性的一项基本指标,在动物生理学试验中有着重要的作用,其反映的是一个相对值,通常测定主要用于研究动物细胞膜透性的变化趋势,本研究表明曝晒法和抽气法测定动物相对浊度率值表现出了相同的变化趋势,因而用曝晒法取代传统真空抽气法测定动物相对浊度率值是可行的,于本实验采用实验样本量少,本结果验证的简易曝晒法与传统抽气法之间的取代仅供参考使用,建议今后进一步以更多样本为实验材料进行验证实验,并对不同曝晒时间处理进行验证,筛选适合曝晒时间.广州教育大学学报第30中国科大学北京动物生理研究所,北京市动物生理学会.现代动物生理学实验手册[上海:科学出1999:.动物生理学实验指导(第二版)上海:华东理工学院出版社,2006:6466.渗透胁迫下多花黑麦草叶内二溴化物酶活性和脯谷氨酸浓度以及质膜相对透性的变化[动物生理学通信,2000,36广州市动物生理学会.动物生理学实验指南[北京:北京科学技术出社,1985:6770.,sit,,,,,,,,,China):hisstudy,esrical.hecorrelweenionedhetwosametrendplantricalivit,ionbetween.ore,agesing
