作者单位：浙江化工职业大学
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科技展望
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年，卷(期)：2010，""(7)
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相像文献(8条)
1.刊物论文冯长根.陈涛.曾庆轩.Feng..Zeng现代分离技术在氯霉素提取中的应用-化工时刊2007,21(1)
综述了近些年来国外外现代分离技术溶剂萃取法、膜分离技术、盐析沉淀法、大孔树脂吸附法及离子交换技术在氯霉素分离提取领域的研究应用进展,并对这种现代分离技术的发展前景做了简略阐述.
2.刊物论文潘云娣.杨文鸽.PANYun-Di.YANGWen-Ge现代分离技术在药物提取中的应用-微生物学通报2005,32(5)
详尽介绍了膜分离技术在药物分离提取中的应用进展,并简单阐述了高效毛细管电泳技术、双水相技术和反胶束萃取技术在药物提取中的应用情况.对这种现代分离技术的发展前景作了简略阐述.
3.刊物论文王玉美探讨膜技术-中国乳品工业2008,""(8)
本文介绍了膜分离技术的应用、原理、类型以及膜污染和清洗,并对膜分离技术的发展前景做出了预测.
4.刊物论文Jeande.袁斌.方煜宇.Jeande.YUANBin.FANGYu-yu现代分离技术在乳品添加剂领域的工业化应用-中国乳品添加剂2008,""(z1)
去年来随着国家环境新政、关税新政的变化,对我国的乳品添加剂行业形成巨大影响.企业必须以改进生产技术水平来提升其竞争力.以色谱分离技术和膜分离技术为代表的现代分离技术,因其面向低污染、低煤耗和高度手动化,被广泛应用于乳品添加剂工业.本文介绍了色谱和膜过滤技术的原理,并重点介绍了这种红色工艺在葡萄柚酸、赖谷氨酸、高果合剂、葡萄糖碱液回收和低聚糖生产领域的应用.
5.学位论文张裕强水蒸汽分馏法与超临界CO萃取法提取荜茇挥发油的比较及膜法精制提油水液的研究2008草药现代化进程，使传统的分离方式面临着挑战和机遇。以草药药效物质精制为目标的分离体系，原料液含量低，组分复杂，回产率要求较高。但现有的传统分离技术如分馏、萃取、结晶、吸附和离子交换等，是以含量差为紊流推进力实现待分离组分由高含量向低含量扩散的，常常未能满足上述分离体系的要求。从现代分离技术的研究发展趋势来看，针对上述问题，可以从两个方面去解决：一是研究新的适用于草药药效物质分离的新技术；二是借助已有的和新开发的分离技术进行有效的组合，或则把两种或两种以上的分离技术联合成为一种更有效的分离技术，以达到提升产品选择性和产率，实现过程优化的目的。
本课题运用近年来较受关注的超临界CO2萃取技术、膜分离技术以及液相色谱-质谱联用技术等，系统地对荜茇主要药效成份之一挥发油的不同提取方式的提取工艺进行筛选和优化，剖析荜茇挥发油的物理成份等。致力阐述不同技术及其联合应用对中草药药效成份进行提取和分离的有效性与相关性。本论文的主要研究工作：
1.采用HPLC法对荜茇单味草药进行质量控制研究，分别采集不同产地不同批号的草药进行基源及浓度测定的研究，确保合格可控的原草药用于本论文研究；并对荜茇提取液(水提液、醇提液)中桂皮碱稳定性的影响诱因(光照、受热湿度及时间、PH等)进行相关研究。
2.采用正交设计法L9(34)，对水蒸汽分馏法(SD)与超临界CO2萃取法(SFE-CO2)提取荜茇挥发油的两种工艺的正交试验结果进行了比较研究。SD法以挥发油萃取率为指标，最优工艺为荜茇草药曝晒1小时，加6倍量水，提取时间为7个小时；SFE-CO2法以挥发油萃取率与桂皮碱转移率的综合评分为指标，最优工艺为萃取压力为20MPa细胞膜色谱，萃取水温为45℃，萃取时间为20min。
3.采用液相色谱-质谱联用(GC-MS)技术，对SD法与SFE-CO2法所提取的荜茇挥发油的物理成份与相对浓度等方面进行了比较研究。结果2种方式所提取的挥发油在外型、得率、化学成份及其相对浓度均存在一定差别。SD法提取的荜茇挥发油呈墨红色的凉爽透明油状液体，萃取率为0.6％，而SFE-
CO2法提取的荜茇挥发油呈桔红色胶状半固体油状物，萃取率为4.36%。采用TLC与HPLC法对2种方式提取荜茇挥发油后药渣中桂皮碱进行剖析及含测研究，SFE-CO2萃取荜茇的剩余药渣中富集桂皮碱，桂皮碱平均浓度为10.37mg/g，远低于SD法提取后
水蒸汽分馏法与超临界CO2萃取法提取荜茇挥发油的比较及膜法精制提油水液的研究药渣中桂皮碱的平均浓度。4.针对SD法提取荜茇挥发油后的水提药液体系，运用无机陶瓷膜微滤技术，以膜通量、药效成份转移率等为指标，综合考察膜结构参数(膜材质、膜孔径)对该体系的适用性以及工艺参数(操作压差、料液流速、操作气温)对膜过程的影响。依据研究获得的适用于该体系的优化参数为：采用0.2μm孔径的ZrO2陶瓷微滤器，操作压差为
0.15MPa，料液流速为3m/s，操作气温为50℃，对SD法提取荜茇挥发油后的水提药液进行微滤精制，适时加盐至支原体积。并剖析了该水提药液体系膜分离前后物质基础(共性高分子)与物化参数(PH值、电导率、粘度等)的变化趋势，进一步验证该技术对此体系精制的相关性与有效性。
本论文研究意义在于：(1)运用现代提取分离检查技术，较为系统地对荜茇药效物质进行提取、分离与剖析。(2)将两种或两种以上提取分离技术联合应用于中草药有效成份的研究中，为阐述面向草药复杂体系精制过程的新型技术运用可行性提供了根据。
关键词：荜茇；水蒸汽分馏；超临界CO3萃取；膜分离：联用
6.大会论文Jeande.袁斌.方煜宇现代分离技术在乳品添加剂领域的工业化应用2008
去年来随着国家环境新政、关税新政的变化,对我国的乳品添加剂行业形成巨大影响.企业必须以改进生产技术水平来提升其竞争力.以色谱分离技术和膜分离技术为代表的现代分离技术,因其面向低污染、低煤耗和高度手动化,被广泛应用于乳品添加剂工业.本文介绍了色谱和膜过滤技术的原理,并重点介绍了这种红色工艺在青柠酸、赖谷氨酸、高果合剂、葡萄糖碱液回收和低聚糖生产领域的应用.
7.刊物论文林霄膜分离技术及其在中草药分离精制研究中的应用-你们健康（月底版）2010,26(4)
膜分离技术是21世纪现代分离技术中重点研究、开发和应用的技术之一,广泛应用于化工、电子、轻工、石油、食品、医药等工业,被觉得是2O世纪末到2I世纪中期最有发展前途的高新技术之一,其在常温下操作无相变,煤耗低等优点,非常适用于热敏性物质和生物活性物质的处理,因此在中草药分离精制中有着极为宽广的应用前景.
8.学位论文宿树兰四物汤类方医治骨科湿热证失眠的物质基础与配伍规律研究——少腹逐瘀汤的基础研究2008本论文研究工作为“江苏省院校自然基金重大基础研究捐助项目—四物汤类方医治骨科湿热证失眠的物质基础与配伍规律研究”的部份研究内容。论文共分两大部份，第一部份较系统地综述了类方研究思路、方法和现况；并对少腹逐瘀汤配伍效应及其物质基础研究进展以及原发性经痛的传统与现代认识进行归纳与剖析。
第二部份实验研究共分为三个章节，具体研究内容和主要推论如下：
第一章在综合剖析文献的基础上，理出研究思路，并设计可行的实验方案和技术路线。
第二章第一节基于关联规则方式对西医古方医治失眠服药规律进行剖析，结果表明，五味子、川芎、赤芍服药频次最高，茴香、小扁豆、五灵脂、没药等服药品率亦低于，10频次，这种抗生素均为少腹逐瘀汤的主要组方抗生素。可见，少腹逐瘀汤在医治失眠疾患方面为一首重要且具有代表性的经典著名温病，为此举办少腹逐瘀汤的基础研究理论意义重大细胞膜色谱，可为该病的医治原理提供根据和借鉴。
第二节以少腹逐瘀汤临床传统服药方式一中药为研究对象，采用水熬煮的方式进行提取，并对其挥发性成份进行搜集；在指出中药作为温病整体作用物质的基础上，又采用现代分离技术大孔吸附树脂法、膜分离技术等对其不同化合物类型进行纯化富集，制备得15个样品(SF-1～15)供生物效应评价及成份剖析。以期阐述生物效应、效应物质及其二者之间的关系，为阐述少腹逐瘀汤的效应物质基础及配伍规律提供科学根据。
第三节选择整体植物模型(寒凝血瘀小鼠模型)、离体脏器模型(离体卵巢收缩模型)、体外筛选模型(血小板集聚模型)等从血液流变学、内分泌激素等多层面对少腹逐瘀汤及各分离部位进行生物效应评价。主要研究结果为：
1.寒凝血瘀SD小鼠模型研究结果表明：少腹逐瘀汤及其醇溶部位才能显著改善寒凝血瘀型SD小鼠血液流变学指标，全血黏度、血浆黏度、血沉及红细胞压积；对子宫功能也具有一定改善作用。
2.大鼠原发性经痛模型研究结果表明：少腹逐瘀甜汤煎液及其醇溶部位对经痛模型大鼠呈现较强的止痛作用，且少腹逐瘀汤醇溶部位作用硬度稍弱于水提液，但二者间比较无明显性差别。
3.大鼠离体卵巢收缩模型研究结果表明：少腹逐瘀汤及其挥发油部位、醇沉碱液部位、40％、60％醇洗部份均呈现出对卵巢收缩的显著抑制活性；而沉淀部份(生物大分子物质)中相对分子质量大于50kD部份(SF-9)对大鼠离体卵巢收缩模型呈现激动作用。
4.体外血小板集聚试验结果表明：少腹逐瘀汤分离富集部位20％-40％醇洗部位对ADP诱导的血小板集聚具有明显的抑制活性，其中40％醇洗部位效应最明显(P
5.少腹逐瘀汤及其各分离部位对子宫细胞促增殖实验结果表明：少腹逐瘀汤及其挥发油高含量组(200μg/mL)、20％醇洗部位三个含量组、40％、50％醇洗部位两个含量组(20μg/mL、200μg/mL)对小鼠乳腺细胞具有显著促增殖作用(P
6.少腹逐瘀汤及各部位对小鼠巨噬细胞NO的影响研究表明：少腹逐瘀汤及各部位(40％-80％乙酸洗脱部位)高含量组(200μg/mL)均能明显抑制小鼠巨噬细胞NO的形成(P
7.少腹逐瘀汤及分离部位对MCF-7细胞增殖及雌激素受体的影响结果表明，SF-5(20％乙酸洗脱部份)、SF-9(60％乙酸洗脱部份)、SF-10(70％乙酸洗脱部份)以及SF-15(生物大分子)在20、100μg/ml对MCF-7细胞的增殖均表现出不同程度的推动作用。少腹逐瘀甜汤煎液、SF-6(30％乙酸洗脱部份)、SF-8(50％乙酸洗脱部份)、SF-10(70％乙酸洗脱部份)在100μg/ml与20μg/ml剂量时可以作用于MCF-7雌激素受体效应器件，显著提高MCF-7细胞的荧光抒发硬度，呈现拟雌激素效应。
基于以上七方面的生物效应初步评价表明，少腹逐瘀汤及其挥发油部位、醇溶部位、40％醇洗部位及60％醇洗部位为少腹逐瘀汤中主要效应部位
，为进一步研究其物质基础提供了科学指引。
第四节采用现代剖析方式(GC-MS、HPLC-MS/UPLC-Q-TOF-MS等)、效应成份筛选方式(如细胞膜萃取色谱法)、建立适合的物理模型等方式对少腹逐瘀汤及效应部位的配伍效应及物质基础相关性进行剖析评价，研究结果表明：
1.采用HPLC-DAD-ESI-MS法、通过标准化合物对照及质谱特点剖析对少腹逐瘀汤中的主要色谱峰进行了归属和指认，剖析鉴别了其中11个化合物分别为连翘苷、芍药香豆素苷、原儿茶酸、咖啡酸、香草酸、盐酸川芎嗪、阿魏酸、异鼠李素-3-O-芸香香豆素、异鼠李素-3-O-新香茅香豆素、洋柴胡香豆素H、洋柴胡香豆素I，为阐述少腹逐瘀汤
的效应物质提供了根据。2.采用UPLC-MS/MS联用技术对少腹逐瘀汤及拮抗离体卵巢收缩活性部位中的主要成份进行剖析鉴别。结果表明UPLC剖析方式可在10分钟之内将样品完全分离，显示出其快速分离剖析的特性和优势；MS采用正离子操作模式可使样品中化学成份得到较好的质谱讯号。进一步验证了HPLC-MS的研究结果，为该技术在温病及其复杂物质基础的剖析鉴别提供了借鉴和参考。
3.少腹逐瘀汤及组方草药中挥发性成份与抑制大鼠离体卵巢收缩效应之间的相关性研究结果表明各草药挥发油部位对温病的活性均有一定贡献率
，活性强弱依次为：当归挥发油>柴胡挥发油>小扁豆挥发油>茴香挥发油>当归挥发油；ED50分别为7.78μg/ml、14.52μg/ml、15.27μg/ml、
22.75μg/ml、23.09μg/ml；PCA方式剖析结果表明温病及组方草药挥发性成份中9个物理成份为活性的主要贡献者，贡献率由大到小依次为：3-(41)、(52)、(Z)-(44)、(45)、A(46)、(42)、β-(27)、(22)、n-acid(48)，其物理结构类型主要为苯酞类、萜内脂类、倍半萜类成份，物理模型的剖析评价结果得到了实验结果的支持。为温病复杂效应物质的阐述提供了新的思路和技巧。
4.采用HPLC法对40％甲醇洗脱效应部位(SF-7)中主要物理成份进行定量剖析，结果剖析测定了效应部位中7个主要物理成份(即香草酸、咖啡酸、芍药香豆素苷、芍药苷、阿魏酸、香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新香茅香豆素)的浓度；大鼠离体卵巢收缩模型实验结果表明：在200μg/ml剂量下效应部位SF-7及化合物组合的抑制率分别为63.2％及53.9％，化合物组合物的效应达到了效应部位的8
5.2％，表明7个主要物理成份按比列配比的组合物才能较好的代表效应部位SF-7的效应。在7个单体化合物中，香草酸、阿魏酸及香蒲新苷具有明显活性ED50分别为57.63、63.10、109.68μg/ml，而其余四个化合物作用不明显。进一步对香草酸、阿魏酸及香蒲新苷根据其在活性部位中的浓度比列进行混和，其混和物抑制离体卵巢收缩活性明显，ED50为65.49μg/ml。提示少腹逐瘀汤诊治寒凝血瘀型原发性经痛的效应部位中抑制幼鼠离体卵巢收缩的主要效应成份主要为香草酸、阿魏酸及香蒲新苷。
5.细胞膜萃取.色谱/质谱联用技术剖析评价少腹逐瘀汤效应部位对HUVEC损伤的保护作用及其效应成份，结果表明：少腹逐瘀汤效应部位SF-7对
Adr造成的内皮细胞损伤具有明显的保护作用(p
在含量为500μg/ml和含量为500μg/ml、20μg/ml时抑制Adr诱导的内皮素(ET)释放(p
10μg/ml时即表现出显著的活性，与部位和全方活性相像。说明通过人脐静脉血管内皮细胞膜萃取色谱质谱联用方式可快速筛选对Adr诱导的细胞损伤具有保护作用的可能效应成份，技巧简捷、快速，为草药/温病复杂物质体系快速确切筛选效应物质提供了快速的手段和技巧。第五节选择少腹逐瘀汤组方草药中两个主要药对柴胡-桑寄生，蒲黄-五灵脂，初步评价了单味药、药对配伍效应及物质基础与少腹逐瘀汤配伍效应及物质基础的比较，以期阐明药对与温病的关系.研究结果表明：
1.以甘草、川芎不同配比药对的挥发性成份进行了大鼠离体卵巢收缩效应的评价，结果表明：柴胡、川芎不同配比药对其效应存在差别，五味子、川芎(2:1)比列配比时其效应最佳；GC-MS剖析结果表明威灵仙、川芎不同配比药对其挥发性成份组成基本一致。但成份间的配比不同，提示可能因为油中主要成份比列的差别造成效应的差别。但几种配比的药对挥发性成份中对效应起主要贡献的可能均为藁本香豆素，本文实验结果也得到了相关文献的支持。
2.大鼠离体卵巢收缩实验结果表明：蒲黄、五灵脂药对对卵巢收缩幅度具有显著抑制作用(P
第六节对少腹逐瘀汤组方草药没药的物理成份进行了研究，从丙酮部位分离纯化，鉴别了五个化合物单体，即香松胶脂酸(acid)(1)、枞酸()(2)、2--5---1(10)-en-6-one(3)、脱氢枞酸(acid)(4)、-1α，2a，3β，25β-(5)。其中化合物5为新化合物。
第三章首次采用计算机降维剖析方式对少腹逐瘀汤组方规律进行关联剖析，并结合实验研究结果，归纳剖析了西医温病配伍组方原理与温病效应物质基础和配伍效应的相关性。
论文主要创新点
1、在本课题施行过程中逐渐产生了从草药—药对—方剂一类方的研究思路和基本认识，从中探求阐明温病及类方配伍规律和科学内涵的有效途径。
2、首次尝试了运用计算机剖析方式、数学模型剖析方式对少腹逐瘀汤组方原理、配伍效应与活性成份的关联剖析，为温病配伍关系的阐明提供了思路和技巧。
3、采用层层递进药效验证的方式，说明少腹逐瘀汤40％醇洗活性部位中抑制离体卵巢收缩的主要活性成份包含香草酸、阿魏酸和香蒲新苷。
4、采用活细胞萃取—色谱/质谱联用技术，并验证了40％醇洗活性部位中保护Adr造成的HUVEC损伤的主要活性成份包含连翘苷和香蒲新苷。
5、探讨了药对配伍效应、效应物质与温病的配伍效应、效应物质的关系，尝试从药对入手阐明温病的配伍关系。
关键词：少腹逐瘀汤；湿热证；原发性经痛；生物效应；物质基础；LC-MS；细胞膜萃取-色谱质谱联用技术；血管内皮细胞；物理模型
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