中国组织工程研究第21卷第12期2017–04–28出版
ofApril28,2017,
·研究原著·
21(12):1843-1848.
DOI:.2095-ORCID:0-3441(吴玮)
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文题释义:
细胞膜片:细胞膜片技术是通过数学的方式将扩增融合的细胞从培养皿底壁分离,获得膜片状细胞结构的一种技术。与传统胰酶消化搜集细胞的方式相比,运用该技术搜集到的细胞保留了体外培养过程中分泌的胞外基质、建立的细胞-基质联接以及细胞间联接等结构。
组织工程:从机体获取少量的活体组织细胞,在体外进行培养扩增,之后将扩增的细胞与具有良好生物相容性、可降解性和可吸收的生物材料(支架)按一定的比列混和,使细胞粘附在生物材料(支架)上产生细胞-材料复合物;将该复合物植入机体的组织或脏器病损部位,随着生物材料在体内逐步被降解和吸收,植入的细胞在体内不断增殖并分泌细胞外基质,最
终产生相应的组织或脏器,进而达到修补外伤和重建功能的目的。
摘要
背景:基于温敏培养皿的细胞膜片技术在组织工程研究中遭到越来越多的关注,而且温敏培养皿价钱昂贵,有必要研究取代方式。
方式:取1例鼻中隔偏曲病人放疗摘除的鼻中隔骨膜消化提取原代骨膜细胞,扩增培养。取第3代细胞在体外密集培养,使之分泌细胞外基质,产生双层细胞膜片;另取第2代骨膜细胞,叠加接种于双层细胞膜片上,使其贴覆生长,产生单层细胞膜片。应用细胞铲刀收获细胞膜片,研究其性状,进一步在体外培养、植入裸鼠体内建立出人工骨膜块。
结果与推论:①单层细胞膜片和单层细胞膜片均产生质软的凝胶样结构,大体观察二者无显著区别;②新刮起的细胞膜片具有良好的可流动性和成胶性;植入裸鼠体内培植8周以后,均产生成熟的骨膜块;③组织学观察见细胞膜片是由成层排列的骨膜细胞和细胞外基质组成的薄片,在体外培养过程中即有糖***聚糖和Ⅱ型胶原的初步抒发,植入体内8周过后产生的骨膜呈现为成熟的骨膜组织;④生化定量测量结果表明,DNA浓度低于天然鼻中隔骨膜,而糖***聚糖和甲基脯谷氨酸浓度与天然骨膜差别无明显性意义;⑤结果提示,应用普通培养皿可成功建立并获取细胞膜片,细胞膜片呈现良好的成骨膜性能。关键词:
组织建立;骨膜组织工程;细胞膜片;骨膜;培养;普通培养皿;糖***聚糖;Ⅱ型胶原;成骨膜性能;国家自然科学基金
主题词:
骨膜;培养技术;胶原Ⅱ型;组织工程
基金捐助:
国家自然科学基金青年科学基金项目()
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ZhouLi-bin,WuWei,DingRui-ying,XuBing-xin,HanHao-lun,WangGang,LiBao-wei,WangHong-nan
(ofHeadandNeck,the306thofPLA,,China)
:Thecell-sheet,basedona-,hasbeenmoreandmore;,the-dishisquite.细胞膜片,itistoa.
ISSN2095-21-1581/RCODEN:周丽斌,男,1982年生,广东省余江县人,汉族,2011年解放军第四军医学院结业细胞膜片,博士,主治医师,主要从事骨膜组织工程研究。
通信作者:吴玮,解放军第306诊所耳鼻喉部脖颈内科,上海市