细胞膜电位在细胞通信中有着重要的作用，本人整理了下借助萤光显微镜测定膜电位的方式、用酶标仪测定膜电位的方式以及膜电位的标准曲线制做。
膜电位测定
I.用萤光显微镜测定膜电位的方式
1.试剂
·(3)
·’sMEM(DMEM)
·FBS(fetalserum)
2.方式
1)将消化好的细胞移至DMEM中。
2)加入FBS，控制含量范围在：2-15%。
3)加入(3)，控制含量范围在：1-5µmol/l。
4)用萤光显微镜观察剌激后萤光硬度的变化。[Ar激光(488nm)的激光共聚焦显微镜]，因为(3)的萤光会随气温变化而改变细胞膜电位，所以必须在37℃的条件下测定。因为细胞膜的电位会变化，可以观察细胞质内的萤光硬度变化。
II.用酶标仪测定膜电位的方式
1.试剂
·(3)
测量用缓冲液(pH7.4;20mmol/lHEPES,120mmol/lNaCl,2mmol/lKCl,2mmol/lCaCl2,1mmol/lMgCl2,
5mmol/l)
2.方式
1)培养细胞：在多孔板中培养细胞
2)清洗细胞：用含5µmol/l(3)的检查用缓冲液200µl，清洗多孔板中培养的细胞2次
3)染色：在孔板中加入180µl含5µmol/l(3)的检查用缓冲液，在5%CO2，37℃培养箱中孵育30
分钟。
4)测定：用萤光酶标仪观察剌激后萤光硬度的变化。因为(3)的萤光会随气温变化而改变，所以必
须在37℃的条件下测定，加入20µl含(3)的检查用缓冲液，每隔30秒测定1次萤光变化。
III.膜电位的标准曲线
1.原理
膜电位变化时色素的分布也急剧变化，所以萤光和吸收也会变化。这些变化程度取决于色素的分子数和细胞数的百分比、色素的含量以及细胞的种类。膜电位的标准曲线是通过用电极直接测定目的细胞的膜电位，在该电位所测得的萤光和吸收硬度而制得的。
2.试剂
·(3)
·Eagle-
·PBS
3.方式
1)用Eagle-培养细胞。
2)取PBS中的细胞在37℃的CO2培养箱中孵育30-60分钟，之后改变孵育时间，制备不一样的CO2含量的样品。
3)加入(3)，终含量为2µmol/l。
4)20分钟后，在517nm测定各个含量的萤光硬度，并用电极直接测定此时的电位差。
5)用萤光硬度和对应的电位差来制做标准曲线。
4.其他方式
有钾扩散电位和萤光或吸收硬度比较的方式。缬氨霉素导致钾扩散电位，钾扩散电位(V)是根据等式估算如下：
V=-RT/Flog[K+]in/[K+]out=-59log[K+]in/[K+]out(mV)
所以在缬氨霉素存在时，通过改变细胞外钾离子含量和细胞内钾离子含量，估算扩散电位，测定各个电位的萤光或吸收硬度细胞膜电位，比较后可以得到标准曲线。
细胞膜电位和细胞自噬有着密不可分的关系，假如细胞膜电位崩溃还会出现细胞自噬。目前研究最多的是线粒体和细胞自噬的关系，研究线粒体膜电位可以借助萤光显微镜，也可以借助流式细胞仪。
