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利用萤光偏振光装置对细胞膜流动性进行检查.pdf

更新时间:2023-11-05 文章作者:佚名 信息来源:网络整理 阅读次数:

细胞膜流动性TMA-DPH萤光偏振光检查试剂盒试剂盒存储条件:2-8保存。开盖后组份按要求条件保存。试剂盒组成:产品组成BB-48118-1BB-48118-2组份编号尺寸20--500T组份A:TMA-DPH染色液组份B:稀释液使用说明书各组份存放条件:2-8避光保存;常年不用-20保存。染色液防止反复冻融,须要常年保存可以分装后-20保存。有效期:一年。※※※使用前请仔细阅读产品说明书※※※使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于确诊或医治。产品更新:贝博TM会更新或升级产品,以优化和提高其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照试剂盒中随产品附送的彩印版说明书,不能参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。须要最新电子版说明书时可以在收到产品后发短信索要。使用安全:使用时须要合适的实验室内套,一次性手套。防止皮肤或黏膜与试剂接触。假如试剂不留神接触皮肤或双眼,应立刻用水冲洗。质量控制:贝博TM对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。知识产权:贝博系列试剂盒及其使用方式包含专有技术。JyK物理好资源网(原物理ok网)

注意事项:螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,防止开盖时试剂损失。最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底消除残留清洁剂。实验后完成后所有样品及接触过的器皿应依照规定程序处理。技术支持:产品技术问题可发电邮至咨询。假若您有任何关于产品性能或则新应用和技术的建议,欢迎您随时联系我们。产品简介:膜的流动性是生物膜结构的基本特点之一,主要指膜脂肪酸链部份及膜蛋白的运动状态。膜脂质分子在相变气温以上条件下主要有侧向扩散、旋转、左右摇摆、伸缩振荡、翻转及异化运动等形式。膜蛋白的运动形式大体分为侧向及旋转运动,主要受脂类双分子层的影响。脂肪酸不饱和键浓度和链的宽度显著影响着膜脂流动性,不饱和键的存在会增加膜脂分子间排列的有序性细胞膜流动性,进而降低膜的流动性,短链能减少脂肪酸链尾部互相作用,在相变湿度下,不便于凝集,再者,脂肪酸烃链围绕键由全反式构象到歪扭()的旋转异构运动,也可使流动性加强。生物膜适合的流动性是彰显生物膜正常功能的必要条件,在一定范围内,膜流动性降低,有利于膜中酶分子的扩散和旋转运动,使酶活性降低。JyK物理好资源网(原物理ok网)

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一些载体蛋白分子的运动性也取决于膜中脂质分子的流动性。研究发觉病变对放疗抗生素形成的耐药性主要与细胞膜糖蛋白过度抒发芦丁及其相关酶系活性改变有关,也有许多研究表明耐药细胞膜流动性较亲代敏感细胞显著降低。另有实验研究发觉囊肿癌细胞的恶性程度随着膜流动性的降低而降低,癌症及转移的病变细胞的膜流动性远远低于非转移细胞。因而,对敏感及耐药的病变细胞膜流动性的检测有着重要的意义。膜流动性的测定方式主要有萤光探针标记,电子载流子共振以及差示扫描量热法,-DPH试剂盒是借助TMA-DPH测定膜流动性的萤光探针法,它在脂蛋白及其类似系统的单分子层动力学研究中非常有用。TMA-DPH呈圆锥形,会发生基于按长分子轴线平行排列而形成发射萤光向偶极跃迁,它们对因为周围固醇互相作用而造成的再定位十分敏感。它们广泛地被用于旋转运动研究中的萤光偏振光剖析。TMA-DPH本身不发萤光,当与细胞膜结合后,萤光大大提高细胞膜流动性,TMA-DPH与可用的细胞膜表面成比列,其萤光硬度对由胞吐导致的质膜表面积的降低敏感。因而,其萤光硬度对于造成膜表面积净变化的生理过程敏感,使其成为用于检测例如细胞容积和胞吐变化的风波的优异探针。JyK物理好资源网(原物理ok网)

TMA-DPH萤光偏振光检测可与视频显微镜组合,以在大脂类体和单细胞中提供磷脂次序的空间区分图象。传统的DPH探针可以步入细胞内,贝博试剂盒膜示踪萤光探针TMA-DPH不能步入细胞内,因而TMA-DPH探针较DPH探针能更确切的反应膜脂流动性,本探针的最大迸发波长为355nm,最大发射波长为430nm。试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:仪器HBSS(Hank'n;With:ose;:。:CaCl2()140mg/L(1.261mM)、MgCl2-/L(0.493mM)、MgSO4-/L(0.407mM)、/L(5.333mM)、/L(0.441mM)、/L(4.167mM)、/L(137.931mM)、()48mg/L(0.338mM)、D-/L(5.556mM))或则PBS(pH7.4,实验室常用的10mM乙酸缓冲盐碱液e/’sPBS:约含、、和)或HEPES使用方式:使用注意事项:螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体搜集至管底,防止开盖时液体散落。JyK物理好资源网(原物理ok网)

染色液为DMSO碱液,夏季温度较低时在温度时为融化状态,极易黏附在管壁、吸头壁。注意须要加热溶化,吸头也须要置于培养箱预热,否者容易再度融化在吸头内壁形成耗损。标记的条件因细胞种类而异,按照不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先确定最佳条件。染色工作液的配制:用稀释液稀释TMA-DPH探针1000倍-10000倍,配制成TMA-DPH染色工作液。也可以不用试剂盒中的稀释液,直接用HBSS或无血浆培养基稀释即可。推荐该探针加载含量在1000-5000倍稀释,具体的使用含量需依照实验要求进行优化。用染色工作液重悬细胞,在37孵育15-30分钟。用pH7.4HBSS或或PBS漂洗细胞1用pH7.4HBSS或或PBS重悬细胞用该细胞进行检查。迸发波长355nm,发射波长430nm。按下述公式估算萤光偏振光度P:P=(IVV-)/(IVV+GIVH)其上校正因子G=IHV/:起偏和检偏器光轴同为垂直方向时测得的萤光硬度;IVH:起偏和检偏器光轴分别为垂直和水平方向时测得的萤光硬度。IHV:起偏和检偏器光轴分别为水平和垂直方向时测得的萤光硬度;IHH:起偏和检偏器光轴同为水平方向时测得的萤光硬度。JyK物理好资源网(原物理ok网)

值越大,流动性越小;P值越小,流动性越大。相关产品:产品产品号产品产品号-FITC/PI自噬试剂盒BB-4101细胞周期检查试剂盒BB--EGFP/PI自噬试剂盒BB--1线粒体膜电位试剂盒BB-4105MTT细胞增殖及毒性检查试剂盒BB-4201活性检查试剂盒BB-4106CCK-8细胞增殖毒性检查试剂盒BB-4202活性检查试剂盒BB-4107WST-1细胞增殖毒性检查试剂盒BB-4203活性检查试剂盒BB-4108MTS细胞增殖与毒性检查试剂盒BB-4204活性检查试剂盒BB-4112/PI双染试剂盒BB-4131细胞自噬形态学检查试剂盒BB-4123DAPI染色试剂盒BB-4133染色试剂盒BB-4137细胞存活率测量试剂盒BB-4122AO/EB双染试剂盒BB-4132JyK物理好资源网(原物理ok网)

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