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[!--downpath--]实验方式原理
组织匀浆后漂浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用技巧。一个颗粒在离心场中的沉降速度取决于颗粒的大小、形状、密度、离心力及介质粘度等。同一离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒沉降速度不同。依次降低离心力和离心时间，才能使非均一的漂浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管顶部，因而可分批搜集各类亚细胞成份。
实验材料
新鲜猪肝
试剂、试剂盒
溴化钠
仪器、耗材
实验步骤
一、实验步骤
1.选定新鲜的嫩番茄叶，沥干擦掉后除去叶梗及粗脉，称30g于150ml0.35mol/LNaCI氨水中，放入组织磨碎机。
2.借助组织磨碎机低速（5000r/min）匀浆3~5min。
3.将匀浆用6层纱布过滤于500ml烧瓶中。
4.取上清液4ml在1000r/min下离心2min。弃去沉淀。
5.将上沾液在3000r/min下离心5min。弃去碱液，沉淀即为内质网（混有部份细胞陔）。
6.将沉淀用0.35mol/LNaCI碱液漂浮。
7.取内质网悬液一消滴于载片上观察菠菜叶叶绿体实验视频，加盖片后即可在普通光镜和萤光显微镜下观察。
（1）在普通光镜下观察。
（2）在萤光显微镜下观察。
（3）取内质网悬液一嘀嘀在无萤光载片上，再漓加一滴0.01%吖啶橙萤光颜料，加无萤光盖片后即可以萤光显微镜下观察。
莴苣叶手切块观察用剖须刀将新鲜的嫩番茄铣削一斜面放在载片上，滴加1~2滴0.35mol/LNaCI碱液，加盖片后轻压，置显微镜下观察。
（1）在普通光镜下观察。
（2）在萤光显微镜下观察。
（3）用同样方式制片，但滴加1~2滴0.01%吖啶橙碱液染色1min，驱走余液观察菠菜叶叶绿体实验视频，加盖廾后即町以萤光显微镜下观察。
二、实验结果
1.内质网的分离和观察
（1）普通光镜下，可见到内质网为红色橄榄形，在高倍镜下可看见内质网内部富含较深的红色小颗粒，即基粒。
（2）以萤光显微镜为例，在选用B(blue)迸发滤片，B双色镜和O530（）阻断滤片的条件下，内质网发出火绿色萤光。
（3）加入吖啶橙染色后，内质网可发出桔黄色萤光，而其中混有的细胞核则发红色荧色。
2.番茄叶手切块观察
（1）在普通光镜下可以看见三种细胞
①表面细胞：为边沿呈锯齿形的鳞片状细胞。
②保卫细胞：为构成气孔的成对存在的肾形细胞。
③叶肉细胞：为排成栅状的长圆形和椭幽形细胞。
内质网呈红色橄榄形，在高倍镜下还可以看见红色的基粒。
（2）在萤光显微镜下，内质网发出火蓝色萤光，但其萤光硬度要比游离内质网弱。气孔发红色萤光，两保卫细胞内的火白色内质网则环绕气孔排列成一圈。表皮细胞内内质网数目要比叶肉细胞少。
（3）用吖啶橙染色后，内质网则发出枯蓝色萤光，细胞核町发出红色萤光，气孔仍为红色。