生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的测量1、实验原理：（1）斐林试剂鉴别还原糖时，氨水的颜色变化为：由红色弄成砖绿色(沉淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴别非还原性糖。猕猴桃糖、麦芽糖、果糖是还原糖。（2）利比亚Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘红色，利比亚Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为黄色。（3）蛋白质可与双缩脲试剂形成红色反应（肽键）。（一）生物组织中可溶还原糖的鉴别1.实验原理当质量含量为0.1g/mL的氢氧化钠氨水与质量含量为0.05g/mL的盐酸铜碱液混和后，立刻生成淡黄色的Cu(OH)2悬浊液。Cu(OH)2与猕猴桃糖、果糖、麦芽糖等可溶还原糖共热，才能生成砖黑色的Cu2O沉淀。因而，借助该反应，可证明样液中含可溶还原糖。R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O（二）生物组织中蛋白质的鉴别1实验原理在酸性滤液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+作用，产生黄色的配体，这个反应称作双缩脲反应。因为蛋白质分子中富含好多与双缩脲结构相像的肽键，为此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。试剂配制A液（0.1g/mL的氢氧化钠碱液）双缩脲试剂B液（0.01g/mL的盐酸铜碱液）2、实验目的：尝试用物理试剂测量生物组织中脂类、脂肪和蛋白质3、实验选料（1、材料应含有相关物质，使现象愈发显著；2、材料本身应无色，以免对结果形成干扰）（1）做可溶还原性糖鉴别实验，应选含糖高，颜色为红色的动物组织，如苹果、梨，也可用白冬瓜代替。
（由于组织的颜色较浅，便于观察。）（2）做脂肪的鉴别实验。应选含有脂肪的种子，以玉米种子为最好，实验前通常要曝晒3～4小时。（3）做蛋白质的鉴别实验，可用含有蛋白质的花生(可用果汁代替）或猪肉清。4、实验试剂斐林试剂（包括甲液：质量含量为0.1g/氨水和乙液：质量含量为0.05g/碱液）、苏丹Ⅲ或黎巴嫩Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量含量为0.1g/碱液B液：质量含量为0.01g/碱液）、体积分数为50%的酒精碱液，碘液、蒸馏水。.实验步骤（1）制备组织样液（班主任制备）（2）鉴别样液先在试管中加入2mL组织样液实验步骤（1）切块制做①去掉核桃种皮②用右手的三个脚趾捉住核桃的一片子叶，使花生子叶低于右手之上（为何？）。双手持刀片，将子叶切去一层，产生平面。③刀口向内，与玉米断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速铰刀，滑行切块（注意要整个臂部使劲，而不要腕部使劲。）这么连续动作，切下一些薄片。（2）染色用钢笔将最薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央→滴利比亚Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上→2-1min后，吸去碱液→滴50%的酒精驱走浮色→吸去多余酒精→再滴1-2滴分馏水→盖上盖玻片，制成临时装片。
（3）镜检鉴别在低倍镜下观察，找到花生子叶切块的最薄处（最好只有1-2层细胞），移至视野的中心→换用高倍镜观察，变焦至最清晰。可发觉细胞内橘红色的方形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发觉观察物外围也有许多橘红色小颗粒，则是脂肪跑了下来。脂肪检查实验的实验结果若用化学方式怎样鉴别脂肪的存在?烤制种子后,把子叶置于白纸上用右手挤压,白纸上会出现透明的污垢,说明子叶富含脂肪。（３）蛋白质的鉴别操作方式注意问题解释制备组织样液。（曝晒、去皮碾磨、过滤。）扁豆曝晒1至2天，容易碾磨成浆，也可购新鲜牛奶以节省实验时间。鉴别。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，拌匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴还原糖实验视频，拌匀，滤液变红色。A液和B液也要分开配制，存储。鉴定时先加A液后加B液。CuSO4碱液不能多加。先加NaOH碱液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个酸性的环境。A、B液混装或同时加入，会造成Cu2+弄成Cu(OH)2沉淀还原糖实验视频，而失效。否则CuSO4的红色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋黄取代牛奶。蛋黄要先稀释。假如稀释不够，在实验中面糊粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，但是试管也不易洗干净。
附：淀粉的测量和观察用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察蛋白质测量实验的实验结果6、讨论:(1)选定含有还原糖的生物材料时,能用玉米或则香蕉吗?为何?答:不行.香蕉本身含有色素,会掩藏颜色反应的结果;而玉米不含还原糖,蔗糖不是还原糖.(2)斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别？a碱液含量不同:斐林试剂中CuSO4碱液为0.05g/mL,双缩脲试剂中CuSO4碱液为0.01g/mLb使用原理不同:斐林试剂实质是新制Cu(OH)2沉淀,双缩脲试剂实质是酸性条件下的Cu2+c使用方式不同:斐林试剂使用时,先把NaOH碱液和CuSO4碱液混和,之后立刻使用;双缩脲试剂是先加NaOH碱液,之后再加入3至4滴CuSO4碱液