相关专题
一、实验目的
1.了解细胞膜对物质私密性的通常规律。
2.了解溶血现象及其发生机制。
二、实验原理
细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择私密性屏障。它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。各类物质出入细胞的方法是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水份子可以根据物质含量梯度从渗透抬高的两侧通过细胞膜向渗透压高的右边扩散，这些现象就是渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。将红细胞置于低渗盐氨水中，水份子大量渗到细胞内，可使细胞胀破细胞膜选择性通透，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为白色透明的血红蛋白碱液，这些现象称为溶血。将红细胞置于个别等渗盐氨水中，因为红细胞膜对各类溶质的私密性不同，膜外侧的渗透压平衡会发生改变细胞膜选择性通透，也会发生溶血现象。为此，发生溶血现象所需时间长短可作为检测物质步入红细胞速率的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料，将其装入不同的介质氨水中，观察红细胞的变化。
三、实验用具
(一)材料鸡血细胞
（二）器材普通显微镜、普通离心机、扭力天平、10ml试管、10ml刻度离心管、试管架，2ml注射器（无需针筒）或5ml移液管、洗耳球、滴管、载玻片、擦镜纸、记号笔等。
（三）试剂
1．碱液
猕猴桃糖2.05g
葡萄柚酸钠(.2H2O)0.89g
葡萄柚酸（C6H6O7.H2O）0.05g
溴化钠0.42g
分馏水100ml
调PH至7.2，过滤杀菌或高压杀菌10min，置4℃冰箱保存。
2.0.128mol/LNaCl氨水。
3．0.05mol/LNaCl氨水。
4．0.4mol/LNaCl氨水。
3.0.128mol/LNH4Cl氨水。
4.0.128mol/LNH4AC氨水。
5.0.128mol/LNaNO3氨水。
7.0.32mol/L猕猴桃糖。
8.0.32mol/L甘油。
9.0.32mol/L丙酮。
10.0.32mol/L苯胺。
11.分馏水。
四、实验操作
1．从集市买一只活禽现杀取血5ml（避免污染），倒入盛有20ml’s液瓶中，混匀前置冰柜保存备用（2周内使用）。
2.使用前，取用’s液保存的新鲜鸡血5ml，加入8ml的0.128mol/L的NaCl碱液，当心混匀，1000r/min离心5min，这么3次漂洗，最后配成30%的鸡红细胞（CRBC）悬液。
3.取11支试管，按附录中所示测试碱液，分别采样各3ml，做出标记后，各管均加入红细胞悬液2滴，混匀后静放在温室中，观察各支试管中发生溶血的时间及其变化。
五、观察结果
1.试管内液体分两层：下层浅蓝色透明，上层黑色不透明为不溶血（－），镜检红细胞完好呈双凹盘状。
2.假如试管内液体浑浊，下层带黑色者，称不完全溶血（＋或＋＋），镜检有部分红细胞呈碎片。
3.假如试管内液体变红而透明者，称完全溶血（＋＋＋），镜检发觉细胞全部呈碎片。
六、实验建议
1.鸡血在离心时，试管均需在扭矩天平上平衡。
2.目测红细胞容积或放在带刻度的离心管中，加入生理盐水配成30%的红细胞悬液；
3.试管中有红细胞和测试碱液时，不应强力晃动，以免引起人为的红细胞断裂。
七、实验报告及作业
表4-1各类碱液的溶血现象观察结果
书写实验报告，并就细胞膜对不同物质的渗透性不同，对实验结果进行剖析见表4-1。
目测法判定标准：快速溶血：＋＋＋；慢速溶血：＋＋或＋；不溶血：－