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什么是细胞活性?学习4种常见测量方式

更新时间:2023-10-15 文章作者:佚名 信息来源:网络整理 阅读次数:

实验细胞保持正常状态是实验成功的基石。您在蛋白抒发敲低、药物处理或特殊培养细胞以后,是否有过第一次实验结果令您非常激动、却在以后的重复实验中发觉了误差而令您的心情一落千丈的经历?这是这跟您样本中死亡细胞的水平有关。这也是我们明天想要说的一个话题——定期检测细胞活性,随时关注细胞状态。虽然这组数据不是您课题中所必须的,但它却是您控制实验的有效手段。JiP物理好资源网(原物理ok网)

细胞活性是指样本群体中健康细胞所占的比列。细胞活性的测量对于观察实验过程中细胞的生理状态是必须的。细胞活性会受环境诱因影响,包括细胞培养各参数的改变、药物和生长因子的剌激以及在各类癌症下做出的反应。诸如,癌细胞表现出细胞活性强化,从而导致细胞异常增殖及逃避细胞自噬,与之相反的是,神经退行性和其他组织退行性疾患则以进行性细胞遗失为特点。损伤和感染也会对细胞存活形成负面影响,造成坏死或自噬。以上,细胞本身的健康与癌症之间的关系案例,警示我们在不同实验背景和模型系统中检测细胞活性非常必要。JiP物理好资源网(原物理ok网)

细胞膜选择性通透_细胞膜通透性讨论题_细胞膜通透性和选择透过性JiP物理好资源网(原物理ok网)

科学家们早已开发了用于不同实验平台的多种检查细胞活性的技术。具体来说,细胞检查可以依据测量原理进行分组,包括细胞增殖、质膜完整性、代谢活性和线粒体功能。我们不仅通过活性测量快速查看细胞群体的总体健康状况,还可以达到更深层的需求细胞膜选择性通透,就是通过它来确定活性损坏时细胞的死亡形式-细胞自噬还是坏死。JiP物理好资源网(原物理ok网)

XTT检查(XTTCellKit#9095)是一种可用于测量细胞活性的代谢性检查方式。在健康细胞中,XTT通过线粒体酶转换成白色的甲瓒颜料。接着通过测量450nm处的相对吸光度来恐怕活细胞数目。这些方式的优点之一是操作简单,不须要细胞固定、通透或二次检查方式,而且还能在剖析后能够继续检测细胞。JiP物理好资源网(原物理ok网)

代谢检查的第二个方法是刃天青检查(CellKit#11884)。将刃天青试剂添加到细胞培养物中,在健康细胞中,刃天青试剂通过酯化酶还原成为萤光试卤灵,最终试卤灵的量与样品中的活细胞成比列。与XTT检查类似,刃天青检查中使用的细胞也可以继续用于下游剖析。JiP物理好资源网(原物理ok网)

活/死细胞计数检查是评估细胞活性的另一种常用方式。这一类的测量使用细胞私密性活体颜料、细胞不通透颜料或二者的组合,同时标记细胞群体中的活细胞和死细胞。诸如,台盼蓝是一种杂环颜料,难以穿透细胞膜,因而不会步入健康细胞。并且,发生膜受损的死亡细胞会吸收台盼蓝,所以最终能否使用血细胞计数器计数死亡(红色)和存活(无色)细胞的数目。JiP物理好资源网(原物理ok网)

另外,免疫组织物理法(IHC)也可以测量细胞活性。这些方式通常用于观察在健康与肿瘤组织中靶蛋白的分布及抒发模式,同时在保持组织切块的完整细胞构架的情况下确定发生细胞死亡的区域。通过使用细胞增殖(包括Ki67或PCNA)或自噬(包括裂解的-3和PARP)的标记物进行定量剖析。JiP物理好资源网(原物理ok网)

评估细胞活性的方式有好多,您最常做哪一种呢?欢迎留言到评论区,便于你们交流学习。JiP物理好资源网(原物理ok网)

另外,在细胞实验中,如上文所提,细胞的状态非常重要,要保证实验结果的一致性细胞膜选择性通透,可以通过检测细胞活性保证细胞的健康状态,趁此机会。JiP物理好资源网(原物理ok网)

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