单位：石家庄市中心诊所检验科
乳酸酯化酶(,LDH)是一类烟丙酯腺固醇二核苷(NAD)依赖性激酶。LDH的分子量大概为13-140KD，几乎所有体细胞的细胞质中都富含LDH，其中以骨骼肌、肾和心肌中的浓度最为丰富。
人血浆中的LDH主要是由M、H两种亚基构成的4聚体，所以它有5种同工酶(LDH1-5)，分别是：主要存在于心肌的LD1(H4)、LD2(H3M1)，主要存在于脾肺中的LD3(H2M2)、LD4(H1M3)，主要存在于肝和横纹肌中的LD5(M4)。
实际上临床上常用的α-氨基甲酸酯化酶(α-HBDH)虽然测的是LDH1和LDH2的活性总和。理论上α-HBDH会大于LDH，但实际工作中并非这么。
案例经过
病人男，73岁。纳差：间断上呕吐4年，加重伴头晕1月。现病程：间断上背部痛，腹痛；三年前曾查活检示萎缩性鼻炎；头部CT示肝脏囊肿伴阑尾炎；自诉走路不稳，无关节痛；1月前头晕、食欲不佳，进餐后上手臂搔痒。
查体:T36.4℃、P80次/分、R20次/分、BP120/80mHg，剑突下瘀斑。辅助检测结果：心电图-心电图（十二导）:1.窦性心率；2.II导联ST-T异常活检（消化窥镜室）-胃：萎缩性鼻炎。急诊确诊：慢性萎缩性鼻炎、营养性肾炎。检验科检测结果如下：
病人验血结果
病人肝炎三项结果
病人生化结果
综合病人的检验结果可以认定“患者是慢性萎缩性鼻炎引起维生素B12吸收不足造成的巨幼贫”。那何以α-HBDH＞LDH？
案例剖析
要解答以上疑惑，首先我们要弄清实验室中测量LDH和α-HBDH的原理。本实验室对LDH的测量原理如图：
本实验室LDH的测量原理
由于NADH在340nm处有它奇特的吸收峰细胞膜骨架，所以说LDH的活性与NADH的生成速度成反比。我们把测定NAD+还原率的方式称之为正反应即L法。我们晓得好多生化反应是单向反应，故也可以测其逆反应即NADH的氧化率，如图：
实验室中测定LDH逆反应的测量原理
此时LDH的活性与NADH的消耗速度成反比，此方式称之为P法。由于生物物理好多反应的正逆反应速度不一样，例如此方式中P法大概是L法的2.2倍。
目前各大实验室中都采用IFCC推荐的L法，本实验室所采用的也是L法。由于L法和P法采用的底物不同（L法以乳酸为底物，P法以乙酸酸为底物），所以测得的LDH也会不同。即采用L法时，LDH的参考范围为120-250U/L；采用P法时，LDH的参考范围为200-380U/L。
我们晓得α-HBDH的活性代表乳酸酯化酶中H亚基的活性，因为H亚基主要存在于同工酶LD1和LD2中，为此实验室中所测得的α-HBDH主要代表LD1和LD2的活性之和。其测量原理如图：
实验室中测定ɑ-HBDH测量原理
首先，从图中我们可以看出α-HBDH的活性和NADH的消耗速度成反比，其本质也是P法。由于P法大概是L法的2.2倍，所以此时出现α-HBDH活性小于LDH活性的情况也就不足为奇了。
其次，值得注意的是：从两个指标的测量原理我们可以观察到它们在各自的体系内进行测得，各自的体系环境以及试剂诱因都不一样，假如α-HBDH反应体系中加入激活剂，也会出现α-HBDH小于LDH的情况。
再度，我们测得的是LDH和α-HBDH的酶活性水平，因为酶的活性受气温（LD4和LD5与其它同工酶不同，不是热变性，而是冷变性）、PH值等诱因的影响，实验室所测得的酶活性水平是不能与酶含量水平画等号的。
目前各大诊所检验科对于LDH和α-HBDH的测量基本上采用的是酶促反应速度法。若果采用免疫学的方式测定其含量，就不太可能出现α-HBDH小于LDH的情况了。另外各大诊所检验科检查LDH采用的是L法，假如采用P法，也同样不太可能出现α-HBDH>LDH的情况。
所以，在临床检查过程中，假如出现α-HBDH>LDH的情况也属于正常现象。其实了，这些情况极少见，虽然出现通常也不会超出多少。
知识拓展
那肝炎为什么会造成LDH下降呢？
由于LDH的主要作用是催化乙醛酸生成乳酸，这是糖无氧代谢的最后一步。糖酵解产出的乙酸酸有两个去路：一个是生成乳酸；另一个是步入线粒体后进行三乙酸循环完成有氧氧化。由于红细胞没有线粒体，不能进行三乙酸循环细胞膜骨架，只能进行无氧酵解，所以LDH主要存在于红细胞中，其含量是红细胞外的1000倍。
当病人出现肝炎后，血红蛋白的浓度降低，红细胞膜的骨架发生改变，其“缝隙”增大，LDH还会沿着这种减小的“缝隙”漏到红细胞外。
案例总结
临床检验工作中，对于一些酶类物质的测量大多采用速度法，如肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)、碱性乙酸酶(ALP)、丙氨酸甲基转移酶(ALT)、天门冬谷氨酸羧基转移酶(AST)和本案例中涉及到的乳酸酯化酶(LDH)和α-氨基甲酸酯化酶(α-HBDH)等。
速度法测量的不是酶的含量水平而是酶的活性。由于好多诱因都可影响到酶的活性水平，所以生化检查中所测得的酶的活性水平并不等同于其含量水平。所以当临床检查中遇见α-HBDH>LDH这些情况，我们应当从以下三个方面去考虑。：
第一，技巧学。
通常LDH都是用正向反应测定，也就是L法，而α-HBDH测定相当于逆向反应，即P法。由于逆反应大概是正反应的2.2倍，所以测定值2.2倍于正向反应。故虽然出现α-HBDH低于LDH的情况，通常也不会低于2.2倍。
第二，底物不同。
由于α-HBDH主要测定的是H亚基。而H亚基主要存在于LDH1和LDH2之中，故α-HBDH主要测定的是LDH1和LDH2的活性之和。
因其测定采用的底物为ɑ-酮乙酸，而测定LDH时底物采用的是乳酸，二者的底物不同。所以测定α-HBDH时，并不等同于以乳酸为底物时LDH1和LDH2的活性，而是LDH中的H亚基作用于另一种底物ɑ-酮甲酸的反应。
第三，乳酸酯化酶的几种同工酶的最适pH和最适水温都不相同，所以测定总的LDH活性时并不等同于这几种LDH同工酶的最大活性相乘。
专家点评——朱一堂新乡市中心诊所检验科组长、主任技师、硕士研究生导师。
在物理领域中，加数+加数=和。并且在临床检验工作中，因为方式学的局限性会出现好多“加数+加数＞和”的情况。例如CK-MB＞CK、直接尿酸小于总尿酸，以及本案例中α-HBDH>LDH。
大多数临床大夫对于检验科的检验方式欠缺认识，不能充分理解检验报告的内容。作为检验人员不但要熟练把握实验室中各类指标的检查原理，还要充分把握各类检查方式的局限性，这样就能为临床提供更有价值的检验报告，为病人的初期诊断与医治贡献属于检验人员的一份力量。
【参考文献】
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