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备课素材:为何用钙离子处理大肠球菌易使其处于感受态2022

更新时间:2023-10-13 文章作者:佚名 信息来源:网络整理 阅读次数:

为何用钙离子处理大肠球菌易使其处于感受态人教2019版小学生物学选择性选修三P82说,钙离子处理大肠球菌细胞,使细胞处于能吸收环境中DNA分子的生理状态经而处于感受态:这些状态也叫感受态。这么,为何用钙离子处理大肠球菌易使其处于感受态?细胞还能从周围环境中摄入DNA分子,而且不易被细胞内的限制性核苷酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态称感受态()。自然环境中真菌可以吸收外源遗传物质以降低自身对环境的适应性。通常用理化方式诱导细胞,使其处于最适摄入和容纳外来DNA的生理状态。大肠弧菌是格兰阳性,细胞壁就是肽聚糖+外膜(脂蛋白、脂质单层、脂寡糖)细胞膜选择性通透,这些细胞壁结构不仅作为内毒素使机体发热、白细胞降低之外(其实还可以因此真菌形态、耐药性、结合Mg2+维持离子平衡),与细胞膜出现裂纹吸收DNA并没有哪些关系。野生型大肠球菌并不容易转化,这是因为DNA未能步入野生型大肠弧菌的细胞。经过多年的努力,科学家们发觉了一种方式可以降低细胞吸收外源DNA的效率。那就是用物理方式处理细胞,使其改变膜对DNA的私密性。这些细胞就称为感受态细胞,即细胞处于能摄取核苷酸分午时的生理状态。这些方式早已成为基因工程的常规技术,它对于我们借助体外DNA重组技术来了解真核和原核生物的基因功能非常重要。z4r物理好资源网(原物理ok网)

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病菌的感受态有两种类型:一种是自然感受态(),自然感受态真菌可以自由地吸收DNA,通过它来进行遗传转化;另一种是人工感受态(),在这些转化中,真菌发生改变促使它们能摄取外源DNA。枯草芽孢球菌属于才能发展为自然感受态的细胞,大肠弧菌就属于须要人工处理的细胞。感受态真菌细胞的转化采用硫酸钙的技巧。主要原理就是通过处理使细胞的私密性变大,直观的说,促使细胞膜表面出现一些凹坑,以便外源基因或载体步入感受态细胞。因为细胞膜的流动性,这些细缝会被细胞自身所修补:1、通过处理使细胞的私密性变大。2、使得细胞膜表面出现一些凹坑,以便外源基因或载体步入感受态细胞。3、由于细胞膜的流动性,这些细缝会被细胞自身所修补。其过程是:1.将快速生长的大肠球菌放在经高温(0℃)预处理的低渗碳酸钙氨水中,便会导致细胞膨胀;Ca离子会使细胞膜磷脂双分子层产生液晶结构,使得细胞外膜与内膜间隙中的部份核苷酸酶解离开来,离开所在区域,诱导细胞成为感受态细胞细胞膜私密性发生变化,极易与外源DNA相黏附并在细胞表面产生抗脱氧内质网核苷酸酶的烷基-乙酸钙复合物。z4r物理好资源网(原物理ok网)

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联合其它的二价金属离子(如Mn、Co)、DMSO或还原剂等物质处理,可使转化率提升100~1000倍。2.将该体系转移到42℃下做短暂的热剌激(90s),细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动,并随机出现许多间隙,外源DNA就可能被细胞吸收。步入细胞的外源DNA分子通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养,筛选出带有外源DNA分子的阴性克隆。简而言之,Ca离子使DNA沉淀于细胞表面(类似真核转染的乙酸钙共沉淀),0-42℃的热冲击促使膜表面出现裂纹(很快会被手动修补-疏水作用),极易与外源DNA相粘附并在细胞表面产生脱氧内质网核苷酸酶的甲基-乙酸钙复合物,诱导细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子,而且所吸收的DNA分子不易被细胞内限制酶分解例、下列说法正确的是()A.细胞系泛称可传代的细胞,细胞株是具有特殊性质的细胞系B.用硫酸钙处理大肠弧菌,降低大肠链球菌细胞壁的私密性,使富含目的基因的重组引物步入大肠球菌寄主细胞,所有的细胞都能接纳重组DNA分子C.DNA联接酶还能将任意2个DNA片断联接上去D.试管小孩的获得过程属于严格意义上的克隆解析:阅读题干可知本题涉及的知识点是试管小孩、DNA联接酶、动物细胞培养和目的基因导出微生物,梳理相关知识点,按照选项描述结合基础知识作出判定.细胞系是无限增殖的细胞,细胞株是正常细胞群体细胞膜选择性通透,A错误;将目的基因导出微生物体内,一般是用钙离子处理使其弄成感受态细胞,B正确;DNA联接酶可将具相同的黏性末端的两DNA片断联接上去,C错误;试管小孩是有性生殖,而克隆是无性饲养,D错误.故选:B.学科网(上海)股份有限公司$z4r物理好资源网(原物理ok网)

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