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[!--downpath--]动物通过光合作用可以吸收的色素包括叶绿素和类胡萝卜素,叶绿素包括叶绿素a和叶绿素b两种。 叶绿素吸收光谱中较强的吸收区是波长为640-660nm的绿光和波长为430-450nm的蓝紫光。 但由于叶绿素分子的特殊结构,叶绿素吸收光子时不会发生光解作用叶绿素荧光现象原理,而是形成能量转移或辐射衰变。 当叶绿素分子吸收光子能量达到爆发状态时,叶绿素分子会通过直接能量转移或电子转移的方式完成能量转移。
荧光寿命
当某种物质被激光爆裂时,该物质的分子吸收能量并从能级跃迁到爆裂状态,然后以辐射跃迁的形式发出荧光回到能级。 将突发发光分子的荧光硬度降低至突发时的最大荧光硬度所需的时间为荧光寿命。
荧光寿命检测
荧光寿命是动物叶绿素固有的热阻,它不会受到初始干扰,如波长突发、曝光时间、测量方法或光漂白的影响,它可以被认为是一个状态函数,因此对荧光寿命的检测具有良好的稳定性和精度。 如今,检测物质分子的荧光寿命已成为研究物质的光化学、光物理和光生物学性质以及分子爆发态衰变过程、分子系统微观动力学研究等的重要手段。荧光大多发生在毫秒级别,这恰好是分子运动的时间尺度。 利用时间辨别荧光技术,我们可以直观地看到一些肉眼无法看到的分子间相互作用。 如分子系统中短毛的聚集、蛋白质高级结构的改变等,特别是对动物疾病起到预警作用。
激光诱导叶绿素荧光形成
形成荧光的化学基础是斯托克斯位移。 当一定波长的光子与样品碰撞时,部分光子会被分子吸收,分子的能量下降; 处于较高能态的分子不太稳定,会通过释放能量回到稳定的能级,即较低的能态。 基态时叶绿素荧光现象原理,另一部分将以辐射的形式回到能级。 分子吸收一定频率范围内的突发光,会发生振动弛豫现象,回到高级突发电子态的较低基态。 在这个过程中,分子向上辐射跃迁而形成荧光,这是爆发形成荧光的化学基础。
利用激光主动诱导茎叶绿素形成荧光。 当激光光子照射动物茎时,茎上的叶绿素分子吸收能量,从能级跃迁到爆发状态,而爆发状态是不稳定的。 叶绿素分子会以辐射跃迁的形式回到能级,形成荧光。 该过程发出的荧光具有荧光特性,包括光谱特性和时间特性、荧光光谱的峰值硬度和位置以及谱线。 长度、荧光寿命、上升时间和荧光形成效率。
荧光寿命技术分析
荧光检测技术发展至今,已广泛应用于多个领域,其中主要有动态荧光分析、主动诱导荧光技术和被动荧光检测技术。 传统的荧光检测技术以荧光硬度为测量参数,可以研究动物的生理状况,但由于荧光本身较弱,且容易受到环境光、激发光强度等激励的干扰,无法研究动物的生理状况。被实现。 遥感检测。 荧光硬度与突发光强度成反比。 室外环境空气中的大量微小颗粒会严重影响突发光的硬度分布,进而干扰受激叶绿素荧光硬度。 荧光寿命具有不受外界环境光、荧光散射角、激发光强度等诱因干扰的优点。 而叶绿素荧光寿命成像技术可以实现远距离、大范围的动物生理状况空间分布的检测。
激光诱导叶绿素荧光寿命技术研究
激光诱导叶绿素荧光寿命分析技术基于动物光合作用理论,以动物叶绿素荧光为探针,研究外界刺激对动物生理状况的微妙影响。 检测激光诱导荧光寿命的方法有两种:荧光寿命扫描技术和激光诱导荧光寿命分析技术; 会对动物组织造成损伤,难以应用于体内检测; 而叶绿素荧光寿命成像技术不仅可以实现活体动物的无损检测,还可以获得动物组织特定区域的荧光寿命分布图。 原理是:
一般先将激光束扩束,然后照射动物发出叶绿素荧光,并由ICCD记录荧光信号。 ICCD的任何像素接收到的荧光信号实际上是激光诱导的叶绿素荧光信号。 利用ICCD获得的一组连续变化的叶绿素荧光硬度图被称为CFLIM数据。 CFLIM数据中的每个数据图都是许多荧光信号的轮廓,CFLIM数据也可以看作是具有大量时间通道的像素阵列,其中每个像素可以记录一组离散荧光信号数据的时间通道,对离散荧光数据进行拟合,可以获得平滑的荧光信号曲线。 通过连续拍摄动物特定区域变化的荧光,然后对所有像素点的数据进行拟合,利用拟合后的荧光数据求解系统函数,即可得到该区域内离散荧光信号的分布。频域。 ,以获得每个像素的荧光衰减函数,从而反演其荧光寿命,绘制动物的荧光寿命图。