外泌体是一种由细胞内多泡体与细胞膜融合形成的纳米级小囊泡。它们广泛分布在生物体血液、尿液、胸盆腔肿块等几乎所有汗液中。外泌体半径40~100nm细胞膜受体，密度1.13~1.21g/mL，电镜下观察呈杯状或盘状。作为细胞间通信和遗传物质的重要载体，外泌体可以通过各类生物活性分子，如细胞膜受体、蛋白质、信使RNA（RNA，mRNA）和微小RNA（microRNA，miRNA）的转移直接剌激靶细胞，进而发挥其生物学功能。目前外泌体的发生机制仍不甚明晰，会依照原始细胞不同类型和功能而变。通常觉得外泌体产生和释放受“内吞体分选转运复合体”（ESCRT）调节。
外泌体里富含许多对癌症确诊具有重要作用的分子
外泌体的发觉可以溯源到1983年Pan和在研究网织红细胞成熟到红细胞的过程的研究里，在她们发表的论文中，未成熟的红细胞，即网织红细胞用转铁蛋白受体标记并培养以追踪转铁蛋白受体的运动情况。到目前为止，依然没有一种方式能同时保证外泌体的浓度、纯度、生物活性。当前的研究主要集中在外泌体作为医治靶标、药物或基因载体以及作为癌症标志物的应用。
外泌体的结构组份与生物发生
外泌体的鉴别主要依赖于形态学观察以及对其内含蛋白质、核酸的剖析。常见的外泌体分离提纯方式有如下几种：
离心法：目前最常用提取外泌体的方式，得到的外泌体量多细胞膜受体，但含量不足，电镜鉴定时会发觉外泌体集聚成块，不利于后续实验。密度梯度离心法：常用蔗糖密度梯度离心法，将样本和2种蔗糖氨水一起超速离心，样品中的不同组分沉降到各自等密度区。此法得到的外泌体含量高，但前期打算工作繁重，历时且量少。过滤离心法：外泌体的相对分子质量小于通常蛋白质，选择不同大小侵吞相对分子质量的超滤膜可使外泌体与其他大分子物质分离。此法操作简单省时，并且不影响外泌体的生物活性，但缺点在于提取的外泌体含量不足。旋转超滤法：与过滤离心法原理相像。优点是此法借助甲烷形成的压力将上清过滤，会降低因为压力过大导致的外泌体断裂。同时所需时间短，防止外泌体在开放系统中曝露过久而引起外泌体量降低。连续适应血浆细胞培养结合改良超速离心法：使细胞在血浆梯度递减的过程中逐步减少对血浆的依赖，最后适应无血浆培养。再将搜集到的上清设置2次离心力，第2次离心力起码离心3次。免疫磁珠法：借助包被有外泌体相关抗体（如CD9、CD63）抗原的磁珠与外泌体结合进行分离，无需超速离心，但漂洗液会影响外泌体生物活性，得到的外泌体较难进行后续研究。色谱法：借助凝胶孔隙的孔径大小与样品分子规格的相对关系对溶质进行分离提取外泌体。改良分子排阻色谱法：可以在白血病患儿小容积（1mL）的血清中可靠且容易地回收形态完整的功能性外泌体。其缺点是搜集的外泌体来自血清，含量不够高。
参考文献
YangXX,SunC,WangL,GuoXL.Newinto,andof.J.2019Jul17.doi:10.1016/j..2019.07.021.陈群,吴飏,时国东,etal.病变来源的外泌体在癌症进展中的作用及其诊治意义[J].广州医科学院学报:自然科学版,2019,39(02):300-305.
