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相差镜检术在光学显微镜发展中的重要成就!

更新时间:2024-03-01 文章作者:佚名 信息来源:网络整理 阅读次数:

它是一种通用光学显微镜。 使用光照明,样本中的每个点根据其不同的光吸收率在明亮的背景中成像。 它由物镜、目镜、聚光镜、光源、载物台和支架组成。 聚光镜用于调节显微镜的照明,物镜和目镜是对微小物体进行放大成像的主要部件。在明场显微镜中,具有代表性的是生物显微镜。 将生物标本用染料染色以增加对比度,成为明视野显微镜的主要观察对象。mGX物理好资源网(原物理ok网)

2. 暗视野观察mGX物理好资源网(原物理ok网)

暗场实际上是暗场照明。 其特点与明场不同。 它不直接观察照明光偏光显微镜观察晶体,而是观察被检查物体反射或衍射的光。 因此偏光显微镜观察晶体,视野变成黑暗的背景,而被检查的物体则呈现明亮的图像。 暗场的原理基于光学廷代尔现象。 当强光直接穿过灰尘时,人眼无法观察到。 这是由强光的衍射引起的。 如果你用光线倾斜地照射它,由于光的反射,颗粒的尺寸似乎会增加,使得它们对人眼可见。mGX物理好资源网(原物理ok网)

暗场观察所需的特殊配件是暗场聚光镜。 其特点是不让光束从下往上穿过被检查物体,而是改变光路,使其斜向被检查物体,使照明光不直接进入被检查物体。物镜,利用被检物体表面的反射或衍射光形成明亮的图像。 暗场观察的分辨率远高于明场观察,可达0.02-0.004mGX物理好资源网(原物理ok网)

3. 相差显微镜mGX物理好资源网(原物理ok网)

在光学显微镜的发展过程中,相差显微镜的成功发明是现代显微技术的一项重要成就。 我们知道,人眼只能辨别光波的波长(颜色)和振幅(亮度)。 对于无色透明的生物标本,光线通过时,波长和振幅变化不大,在明视场观察中很难观察到标本。 。mGX物理好资源网(原物理ok网)

相衬显微镜是利用被检物体光路的差异进行显微检查,即有效利用光的干涉现象,将人眼无法区分的相位差转变为可区分的幅度差,即使对于无色透明物质。 变得清晰可见。 这极大地方便了活细胞的观察,因此相差显微镜广泛应用于倒置显微镜中。mGX物理好资源网(原物理ok网)

相差显微镜的基本原理是将可见光透过标本的光程差转化为振幅差,从而提高各种结构之间的对比度,使各种结构清晰可见。 光线穿过标本后发生折射,偏离原来的光路,并被延迟1/4λ(波长)。 如果增加或减少1/4λ,则光程差变为1/2λ,两束光束合并后发生干涉。 加强、增加或减少振幅、增加对比度。mGX物理好资源网(原物理ok网)

4. 微分干涉观测法mGX物理好资源网(原物理ok网)

微分干涉显微镜出​​现于 20 世纪 60 年代。 它不仅可以观察无色透明的物体,而且图像呈现出强烈的立体浮雕感。 它还具有相差显微镜无法达到的某些优点,观察效果更好。 逼真。 微分干涉显微镜使用特殊的沃拉斯顿棱镜来分解光束。 分裂梁的振动方向相互垂直且强度相等。 光束在彼此非常接近的两个点处穿过被检查的物体,但相位略有不同。 由于两束光束之间的分光距离极小,因此不会出现重影现象,使图像呈现三维效果。 差示干式显微镜*的物理原理与相差显微镜不同,技术设计也复杂得多。 DIC使用偏振光,有四个特殊的光学元件:起偏器、DIC棱镜、DIC滑块和检偏器。起偏器直接安装在聚光系统前面,使光发生线偏振。mGX物理好资源网(原物理ok网)

5、偏光观察法mGX物理好资源网(原物理ok网)

偏光显微镜是用来鉴定物质精细结构光学性质的显微镜。 任何具有双折射的物质都可以在偏光显微镜下清晰地区分。 当然,这些物质也可以用染过的头发观察到,但有些是不可能的,必须使用偏光显微镜。 偏光显微镜的特点是将普通光转变为偏振光进行显微镜检查,以鉴定某种物质是单折射(各向同性)还是双折射(各向异性)。 双折射是晶体的基本性质。 因此,偏光显微镜广泛应用于矿物、化学等领域。 它在生物学和植物学中也有应用。mGX物理好资源网(原物理ok网)

6.相差观察法mGX物理好资源网(原物理ok网)

斜光照射标本产生折射和衍射,光线通过物镜的光密度梯度调节器产生不同的阴影,从而在透明标本表面产生明暗差异,增加观察对比度。它不仅可以提高未染色标本的可视性和对比度,而且还可以显示阴影或无光晕的近似三维结构,并可以检测双折射材料(岩石切片、晶体、骨头)、玻璃、塑料和其他培养皿。 细胞、器官和组织mGX物理好资源网(原物理ok网)

7. 荧光观察方法mGX物理好资源网(原物理ok网)

它以紫外光为光源,照射被检物体,使其发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状和位置。 荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收和运输,以及化学物质的分布和定位。细胞内的一些物质,如叶绿素,受到紫外线照射后会发出荧光; 有些物质本身不能发出荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色,经紫外线照射后即可发出荧光。 荧光显微镜是对此类物质进行定性和定量研究的工具之一mGX物理好资源网(原物理ok网)

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